3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine (TMB)是一種過(guò)氧化物酶底物，用于ELISA 反應(yīng)。底物產(chǎn)生一種可溶性淡藍(lán)色的末端產(chǎn)物，可在370 或 655 nm在分光光度計(jì)上讀取。TMB反應(yīng)可以用2 M H2SO4 (產(chǎn)生黃色)終止，450 nm讀取。 TMB又分可溶型和沉淀型。 可溶型：與HRP反應(yīng)形成可溶性藍(lán)褐色產(chǎn)物，適用于ELISA及其他通過(guò)液體反應(yīng)檢測(cè)HRP的應(yīng)用，與HRP反應(yīng)形成沉淀性藍(lán)褐色產(chǎn)物，一步即用型溶液，無(wú)需混合，方便快捷 。 沉淀型：適用于Western Blot及其免疫沉淀化學(xué)等，一步即用型溶液，無(wú)需混合，方便快捷 單組分TMB過(guò)氧化物酶底物正常情況下淡黃色、淡藍(lán)色或者是淡綠色。底物溶液在650nm時(shí)檢測(cè)OD值小于0.04。

  

組成：TMB、H2O2、穩(wěn)定劑。
貯存：密閉、避光、室溫或低于室溫保存。
穩(wěn)定性：室溫或低于室溫保存，有效期大于3年。
使用方法：
   根據(jù)需要等量混合，每孔100ul。注意混合馬上使用，不要超過(guò)1小時(shí)，否則，敏感性降低。

溫育：上述加液后，根據(jù)個(gè)人試驗(yàn)需要，可溫育15－30分鐘。

終止：加等體積的1N的HCl或者2N的H2SO4來(lái)終止反應(yīng)。酶標(biāo)孔中反應(yīng)液從藍(lán)色變?yōu)樯?br /> 讀數(shù)：終止反應(yīng)后，30分鐘內(nèi)在450nm處讀數(shù)
注意：
降低底物強(qiáng)度：如果出現(xiàn)高的反應(yīng)背景和/或沉淀， 表明TMB底物反應(yīng)過(guò)于強(qiáng)烈。為了避免產(chǎn)生沉淀，可以在加入終止液后馬上讀數(shù)；另外，可以進(jìn)一步稀釋一抗和/或HRP結(jié)合物。為了降低非特異性背景顏色，推薦進(jìn)一步降低一抗和/或HRP結(jié)合物的濃度，盡量避免降低底物濃度。
動(dòng)力學(xué)檢測(cè)：TMB單組分底物在與過(guò)氧化物酶反應(yīng)時(shí)產(chǎn)生一種藍(lán)色，可以在加底物后620－650nm處讀數(shù)，不需終止反應(yīng)。

  

WGK Germany  3
RTECS號(hào) DV2300000
F  8-10
危險(xiǎn)品標(biāo)志  Xi,Xn
危險(xiǎn)類別碼  36/38-36/37/38-22
安全說(shuō)明  26-36-36/37

  

在辣根過(guò)氧化酶HRP的數(shù)種顏色反應(yīng)底物中，TMB因其靈敏度較高及無(wú)致癌性而得到廣泛應(yīng)用。本產(chǎn)品采用穩(wěn)定敏感的配方，辣根過(guò)氧化物酶接物反應(yīng)時(shí)產(chǎn)生一種深藍(lán)色的產(chǎn)物，適用于定量以及定性分析的酶聯(lián)免疫分析當(dāng)中，但不適用于膜染色或者是免疫組織化學(xué)染色。

  密封干燥保存。