• 單組分TMB顯色液

  • 英文名：3, 3′,5 ,5′-Tetramethylbenzidine Liquid Substrate
  • 別名：單組分TMB過氧化物酶底物液
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化學性質(zhì)

3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine (TMB)是一種過氧化物酶底物，用于ELISA 反應。底物產(chǎn)生一種可溶性淡藍色的末端產(chǎn)物，可在370 或 655 nm在分光光度計上讀取。TMB反應可以用2 M H2SO4 (產(chǎn)生黃色)終止，450 nm讀取。TMB又分可溶型和沉淀型。 可溶型：與HRP反應形成可溶性藍褐色產(chǎn)物，適用于ELISA及其他通過液體反應檢測HRP的應用，與HRP反應形成沉淀性藍褐色產(chǎn)物，一步即用型溶液，無需混合，方便快捷 。 沉淀型：適用于Western Blot及其免疫沉淀化學等，一步即用型溶液，無需混合，方便快捷 單組分TMB過氧化物酶底物正常情況下淡黃色、淡藍色或者是淡綠色。底物溶液在650nm時檢測OD值小于0.04。

質(zhì)量標準

   

使用方法
使用之前，以超純水反復洗滌的適當容器，倒出適量單組分TMB底物溶液，待溶液達到室溫即可使用。
加液：加完HRP結合物并溫育一定時間后，洗板3－5次，每孔加TMB底物100－150uL， 37°C溫育15－30分鐘。
終止（備選）：加等體積的1N的HCl或者2N的H2SO4來終止反應。酶標孔中反應液從藍色變?yōu)辄S色。
讀數(shù)：終止反應后，30分鐘內(nèi)在450nm處讀數(shù)。不加終止液，顯色更加穩(wěn)定，可以在620－650nm處讀數(shù)。



 

   

危險性質(zhì)

   

用途及存儲

TMB因其靈敏度較高及無致癌性而得到廣泛應用。單組分TMB過氧化物酶底物與辣根過氧化物酶連接物反應時產(chǎn)生一種深藍色的產(chǎn)物，適用于定量以及定性分析的酶聯(lián)免疫分析當中。

    密封干燥保存。